退火温度是什么意思啊

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引物越长,能够配对的概率减少,所以特异性增加

or引物越长,包含的碱基越多,发生错配的概率就越高

这两句话是对应了不同的情况，第一句话是指引物越长,Tm相对越大，退火温度可以越高（这一句一定不能省略），所以发生错配的概率减少,所以特异性增加。

而第二句话是指，在相同的退火温度下，引物越长,包含的碱基越多,发生错配的概率就越高

各位高手，我的PCR条带弥散，阴性对照也弥散，但是不加引物不弥散，当然也没有条带，请问都是什么原因啊？

硬度区别。

TU1是不含氧也不含任何脱氧剂残留物的纯铜。但实际上还是含有非常微量氧和一些杂质。按标准规定，氧的含量不大于0.03%，杂质总含量不大于0.05%，铜的纯度大于99.95%。

TU1无氢脆现象，导电率高，加工性能和焊接性能、耐蚀性能和低温性能均好。

TU1板带材是电真空行业的关键材料，由于电真空器件如大功率发射管、磁控管、行波管、真空电容器、真空开关等，均需要在 920 ℃ 的高温下，在氢气中进行钎焊，此时氢气与铜中的氧会发生 Cu 2 O+H 2 → Cu+H 2 O 反应，所产生的水蒸气将会导致铜材的晶间裂纹，从而引起真空品件泄漏

TU1化学成分：

铅(Pb) ≤0.003

锌(Zn) ≤0.003

铁(Fe) ≤0.004

磷(P) ≤0.002

铋(Bi) ≤0.001

锑(Sb) ≤0.002

硫(S) ≤0.004

锡(Sn) ≤0.002

镍(Ni) ≤0.002

砷(As) ≤0.002

氧(O) ≤0.002

铜+银(Cu+Ag) ≥99.97

杂质总各% ≤0.03

TU1物理化学性能：

A热性能

熔点：1082.5-1083摄氏度

热导率：20摄氏度时为391W/（m.℃）

比热容：20摄氏度时385J/（Kg.℃）B质量特性：

TU120℃时，凝固时的收缩率为4.92%，密度为8.94g/cm3

TU1热加工与热处理规范：

退火温度：375-650摄氏度

热加工温度：750-875摄氏度

TU1硬度：

室内温度：HBS35-45（M态），HBS85-95（Y态）

阴性对照的作用就是来判断实验是否有污染的，如果PCR条带和阴性对照都弥散的话，原因应该是污染。污染一般有试剂的污染，也有可能是环境的污染。

先说试剂的污染。你设置的阴性对照所用的每一种试剂都存在被污染的可能，最实际也最麻烦的方法就是，每次更换一种试剂，重复实验，从而确定那种试剂发生污染。你提到的不加引物不弥散，那是必然的结果，及时所有试剂都发生了污染，不加入引物，扩增也是没办法进行的，结果也不会有条带。

再说环境的污染。环境的污染一般就是指气溶胶的污染，PCR实验室多少都会存在这种问题，气溶胶是比较难以消除的。先假设你所用的试剂都是正常的，你可以选择两到三对PCR产物片段较长的引物做试验（比你此次出问题的实验所选的要长），进行正常PCR，电泳看结果是如何，如果不出现弥散现象，可初步判断为气溶胶污染。接着选两到三对产物片段较短的做实验（同上），观察结果，如果同样出现弥散现象，此时可断定确实是气溶胶污染。

以上所说，属于理想状态，首先要排除个人操作失误，另外具体的情况再具体分析！

个人理解，希望对你有帮助！

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